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Id:PE1.1
Autor:Wiemer, Klaus E; Stachecki, James J.
Título:Resultados del uso de un sistema cerrado (S3) en la vitrificación de blastocistos humanos^ies / Results following the use of a closed system (S3) for vitrification of human blastocysts
Fuente:Rev. peru. ginecol. obstet;57(1):18-20, ene.-mar. 2011. ^bilus, ^btab.
Conferencia:Presentado en: Simposio: Tecnología de Laboratorio en Reproducción Asistida, Lima, 2011.
Resumen:Este artículo describe el uso de un sistema cerrado de vitrificación que es fácil de usar y permite que los blastocitos sean vitrificados en un recipiente seguro y cerrado. Este sistema no utiliza dimetil sulfóxido (DMSO) como crío-protector y se le denomina vitrificación S3. Blastocistos humanos fueron vitrificados en los días 5 y 6 de desarrollo (día de recuperación es igual a día 0). Se conservó solo blastocistos completos de alta calidad o avanzados en el desarrollo. Se realizó un total de 139 transferencias, con una tasa de supervivencia global de 81%. La tasa de embarazos nacidos y en curso es de 58%, con una tasa de implantación de 48% para todos los pacientes en todos los grupos de edad. Los resultados globales obtenidos con este sistemacerrado son alentadores. (AU)^iesThis paper describes the use of a closed vitrification system that is easy to use and allows the blastocysts to be vitrified in a closed secure container. This system does not use dimethylsulphoxide (DMSO) as a cryoprotectant as well. This system is referred to as S3 vitrification. Human blastocysts were vitrified on Days 5 and 6 (Day ofretrieval equals Day 0). Only high quality full blastocysts or greater in development were preserved. A total of 139 transfers have been performed with an overall survival rate of 81%. The delivery/ongoing pregnancy rates are 58% with a 48% implantation rate for all patients in all age groups. The overall outcomes achieved with this closed system are encouraging. (AU)^ien.
Descriptores:Vitrificación
Blastocisto
Fertilización In Vitro
Criopreservación
Límites:Humanos
Medio Electrónico:http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/ginecologia/vol_57n1/pdf/a04v57n1.pdf / en
Localización:PE1.1

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Id:PE1.1
Autor:Vásquez Eslava, Martha Elizabeth; Cueva Moreno, Sergio Augusto; Cordero Ramírez, Aída del Carmen; Gonzales Castillo, Mario Lino; Huanca López, Wilfredo.
Título:Evaluación de dos métodos de criopreservación de embriones de llamas sobre las tasas de supervivencia in vivo e in vitro^ies / Evaluation of two embryo cryopreservation methods in llama on the in vivo e in vitro embryonic survival rates
Fuente:Rev. Invest. vet. Perú;22(3):190-198, jul.-sept 2011. ^bilus.
Resumen:El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de dos métodos de criopreservación sobre la supervivencia in vivo e in vitro de embriones de llama. Se recuperaron 73 embriones en estadio de blastocisto eclosionado mediante una técnica no quirúrgica a los 6.5 días post servicio en llamas superestimuladas. Las llamas receptoras se distribuyeron aleatoriamente en grupo Control (n = 14), de vitrificación (n=30) y de congelación lenta (n=29). Para la vitrificación, los embriones fueron expuestos a la solución de vitrificación (SV) conteniendo 20% Glicerol + 20% Etilenglicol + 0.5M Sucrosa + 10% suero fetal bovino (SFB) + 50 µg/ml sulfato de gentamicina, y sumergidos en nitrógeno líquido dentro de pajillas de 0.25 ml. Para la congelación lenta, los embriones fueron expuestos a fosfato buffer salino (PBS) con 1.5 M de Etilenglicol + 10% de SFB + 50 µg/ml de sulfato de gentamicina, aspirados en pajillas de 0.25 ml, y enfriados a una tasa de descenso de 0.12 °C/min hasta 5 °C y, luego, en la boca del tanque de nitrógeno, se continuó el descenso a una tasa de 5 °C /min hasta -20 °C por 5 min, y luego se sumergieron en el nitrógeno líquido. En la descongelación se utilizaron soluciones de dilución conteniendo dos concentraciones de sucrosa: 0.5 M y 0.2 M para congelación lenta y 0.25 M y 0.12 M para vitrificación. Se realizó una evaluación in vivo a todos los embriones del grupo control y al 50% de los embriones de los dos grupos experimentales, mediante transferencia directa a hembras receptoras previamente sincronizadas. El diagnóstico de preñez se llevó a cabo por ecografía transrectal a los 20 y 30 días. La preñez fue de 4/13, 2/12 y 0/11 para las receptoras de los grupos Control, Vitrificados y Congelación lenta, respectivamente, sin diferencia estadística. Para la evaluación in vitro, los embriones criopreservados fueron cultivados en PBS + 20% SFB, en una atmósfera compuesta por 5% de CO2, 20% de O2 y 75% de N2, durante 1 h a 39 °C, y se observó ... (AU)^iesThe aim of the study was to evaluate in llama embryos the effect of two cryopreservation methods on the in vivo and in vitro survival rate. Seventy three hatched blastocysts were recovered by a non-surgical technique at day 6.5 after mating from superstimulated llamas. Receptors were randomly allocated to a control group (n=14), vitrification (n=30) and slow freezing (n=29). On vitrification, embryos were exposed to a vitrification solution (VS) containing 20% Glycerol + 20% Ethylene glycol + 0.5 M Sucrose + 10% fetal calf serum (FCS) + 50 µg/ml gentamicin sulfate, and then plunged into liquid nitrogen in 0.25 ml straws. On the slow freezing, embryos were exposed to phosphate buffer saline (PBS) with 1.5 M Ethylene glycol + 10% FCS + 50 µg/ml gentamicin sulfate, loaded in 0.25 ml straws, and cooled at a rate of 0.12 °C/min to 5 °C. Then, further temperature decrease at 5 °C /min rate, to -20 °C, for 5 min at the mouth of the nitrogen tank; finally straws were plunged into liquid nitrogen. For thawing, two dilution solutions were used composed of two sucrose concentrations: 0.5 M and 0.2 M for slow freezing, and 0.25 M and 0.12 M for vitrification. An in vivo evaluation was performed in all embryos of the control group and in 50% of the experimental groups by direct transfer into previously synchronized female recipients. Pregnancy diagnosis was carried out by transrectal ultrasound evaluation at 20 and 30 days. Pregnancy was in 4/13, 2/12, and 0/11 in recipients from control, vitrification and slow freezing groups respectively, without significant difference. For the in vitro evaluation cryopreservated embryos were cultured in PBS + 20% FCS under atmosphere compose of 5% CO2, 20% O2, and 75% N2 at 39 °C for 1 h, then reexpansion ... (AU)^ien.
Descriptores:Camélidos del Nuevo Mundo
Criopreservación
Embrión de Mamíferos
Vitrificación
Congelación
Preñez
Epidemiología Experimental
 Perú
Límites:Animales
Medio Electrónico:http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/veterinaria/v22_n3/pdf/a03v22n3.pdf / es
Localización:PE1.1

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Autor:Ruiz Béjar, Jaime Antonio; Landeo Jurado, Leandra; Marino Artica, Félix; Ratto Fuster, Marcelo Héctor; Correa Soto, Jorge Eduardo.
Título:Activación química de ovocitos de alpaca vitrificados después de la maduración in vitro^ies / Chemical activation of alpaca oocytes vitrified after in vitro maturation
Fuente:Rev. Invest. vet. Perú;22(3):206-212, jul.-sept 2011. ^bilus.
Resumen:Se evaluó la viabilidad posdescongelamiento de ovocitos de alpaca vitrificados luego de la maduración in vitro. Los ovocitos fueron recuperados de ovarios obtenidos en el camal Municipal de Huancavelica, Perú, madurados in vitro por 24-25 h en una cámara modular con 5% de O2, 5% de CO2 y 90% de N2 en medio TCM-199 suplementado con Piruvato de Na, HEPES, sulfato de gentamicina, FSH, estradiol 17-beta y suero fetal bovino. Los ovocitos fueron separados de las células de la granulosa con hialuronidasa al 0.1% y distribuidos en tres tratamientos: T1 (n=107), ovocitos expuestos a las soluciones crioprotectoras y vitrificados; T2 (n=121), ovocitos expuestos a las soluciones crioprotectoras no vitrificados (control de toxicidad de los crioprotectantes); T3 (n=232), grupo control de ovocitos no expuestos a las soluciones vitrificantes. Los ovocitos fueron vitrificados en microgotas sobre un papel de aluminio flotando en nitrógeno líquido, utilizando una solución de equilibrio con 4% de etilenglicol y una solución de vitrificación con 35% de etilenglicol, 5% de polivinilpirrolidona y 0.4 M de trehalosa. Las microgotas vitrificadas se almacenaron en nitrógeno líquido y fueron descongeladas 1-4 después. Todos los ovocitos fueron cultivados en SOF-HEPES con 5 uM de ionomicina de Ca por 4 min a temperatura ambiente y luego cultivados por 3 h en 6-DMAP a 38.5 °C en una atmósfera húmeda con 5% de O2, 5% de CO2 y 90% de N2. Luego se cultivaron por 8 d en medio SOF-IVC. Se encontró 58.4, 68.7 y 97.3% de ovocitos morfológicamente normales para T1, T2 y T3, respectivamente. Las tasas de segmentación fueron de 39.9, 49.5 y 62.3%, y las tasas de blastocistos fueron de 0, 0 y 9.2% para T1, T2 y T3, respectivamente. Los resultados demuestran que los ovocitos de alpaca pueden ser vitrificados con el método de superficie sólida y que son viables morfológicamente y fisiológicamente posdescongelamiento. (AU)^iesThe aim of this study was to evaluate the viability of vitrified/thawed alpaca oocytes after in vitro maturation. Alpaca oocytes were retrieved from ovaries obtained in theslaughterhouse of Huancavelica, Peru and matured in vitro for 24-25 h in a modular chamber with 5% O2, 5% CO2 and 90% N2 in TCM-199 medium supplemented with sodium pyruvate, HEPES, gentamycin sulphate, FSH, estradiol 17-beta and fetal calf serum. Then, oocytes were fully denuded of cumulus cells with 0.1% hyaluronidase and assigned to three treatments: T1 (n=107), oocytes exposed to cryoprotectans and vitrified; T2 (n=121), oocytes exposed to cryoprotectans without vitrification; and T3 (n=232), control group of oocytes not exposed to vitrification solutions. Alpaca oocytes were vitrified in microdrops on a precooled aluminum foil floating in liquid nitrogen, using an equilibrium solution with 4% ethylene glycol and a vitrification solution with 35% ethylene glycol, 5% polyvinyl-pyrrolidone and 0.4 M trehalose. The vitrified microdrops were stored in liquid nitrogen and were thawed 1-4 d later. All oocytes were cultured on SOF-HEPES with 5 umM Ca ionomycin by 4 min at room temperature followed by 3 h incubation in 6-DMAP at 38.5 ºC in a 5% O2, 5% CO2 and 90% N2 in humidified atmosphere. Subsequently, were cultivated on mSOF medium during 8 days. The rates of oocytes survival were 58.4, 68.7 and 97.3% in T1, T2 and T2 respectively. The rates of cleavage were 39.9, 49.5 and 62.3% and rates of development to blastocysts were 0, 0 and 9.2% in T1, T2 and T3 respectively. The results showed that alpaca oocytes were morphologically and physiologically viable after vitrification by solid surface method. (AU)^ien.
Descriptores:Oocitos/química
Vitrificación
Camélidos del Nuevo Mundo
Partenogénesis
Límites:Animales
Medio Electrónico:http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/veterinaria/v22_n3/pdf/a05v22n3.pdf / es
Localización:PE1.1



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