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Id:PE13.1
Autor:Sandoval Ahumada, Roxana Elizabet
Título:Estandarización y evaluación de la técnica Dot blot para el tamizaje de cisticercosis humana^ies Standardization and evaluation of the Dot blot technique for screening human cysticercosis Standardization and evaluation of the technique Dot blot for the screening of human cysticercosis-
Fuente:Lima; s.n; 2013. 43 ilus, tab.
Tese:Presentada la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Medicina para obtención del grado de Especialista.
Resumen:Con el propósito de obtener una técnica altamente sensible y de bajo costo para el tamizaje de cisticercosis humana en zonas endémicas, se evaluó la prueba de Dot blot para la detección de anticuerpos en suero de personas infectadas por esta parasitosis. Para evaluar la eficiencia de la técnica, se emplearon sueros confirmados por Western blot, de los cuales, 60 procedían de pacientes con cisticercosis, 45 de pacientes con otras parasitosis y 20 de personas sanas, estos últimos para evaluar reacciones cruzadas. Se usó papel de nitrocelulosa, en el que el antígeno total de líquido vesicular de cisticercosis de Taenia solium fue fijado. A continuación, la tira fue incubada con el suero problema y luego con anti-IgG humano marcado con una enzima. El suero que tenia anticuerpos, al agregar un sustrato cromógeno, originó un producto insoluble que precipitó formando un punto en la zona donde se produjo la reacción antígeno-anticuerpo. La sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y valor predictivo negativo de la prueba Dot blot fue de: 100 por ciento, 83 por ciento, 84 por ciento y 100 por ciento respectivamente. El índice de Kappa obtenido fue 0,98, lo que la califica como una prueba que tiene muy buena concordancia con el western blot. Por su alta sensibilidad, el uso de la prueba Dot blot parece ser un enfoque adicional para el descarte de cisticercosis, con la ventaja de la simplicidad y rapidez, susceptible de prepararse en regiones endémicas del país, constituyendo una buena alternativa como prueba de tamizaje y para estudios epidemiológicos, recomendándose por tanto su uso. (AU)^iesWith the intention of obtaining a highly sensitive technology and of low cost for screening human cysticercosis in endemic zones, Dot blot test was evaluated for the detection of antibodies in persons' whey infected by this parasitosis. To evaluate the efficiency of the technique, there were used serums confirmed by Western blot, of which, 60 were coming from patients with cysticercosis, 45 of patients with other parasitosis and 20 of healthy persons, the above mentioned to evaluate crossed reactions. Nitrocellulose paper was used, in that the total antigen of liquid vesicular of cysticercosis of Taenia solium was fixed. Next, the strip was incubated with serum and then with anti-human IgG labeled with an enzyme. The serum had antibodies, by adding a suitable chromogenic substrate, resulted in an insoluble product which precipitated forming a point in the area where there was a reaction antigen-antibody. The sensibility, specificity, predictive positive value and predictive negative value of the test Dot blot was of: 100 per cent, 83 per cent, 84 per cent and 100 per cent respectively. The Kappa index obtained was 0.98, which qualifies it as a test that has very good conformity with the western blot. For his high sensibility, the use of the test Dot blot seems to be an additional approach for the discarded cards of cysticercosis with the advantage of the simplicity and rapidity, capable of to prepare in endemic regions of the country, constituting a good alternative as a screening test and for epidemiological studies, his use being recommended. (AU)^ien.
Descriptores:Cisticercosis/diagnóstico
Sensibilidad y Especificidad
Inmunoensayo/métodos
Suero
Estudio Observacional
 Estudios Prospectivos
 Investigación Cualitativa
Límites:Humanos
Localización:PE13.1; ME, QW, 525.5.I32, S21, ej.1. 010000094166; PE13.1; ME, QW, 525.5.I32, S21, ej.2. 010000094167

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Id:PE14.1
Autor:Ayala Sulca, Eduardo Renato; Miranda Ulloa, Eduardo Fernando.
Título:Evaluación de electroinmunotransferencia utilizando antígeno mix nativo purificado de líquido de cisticerco de Taenia solium para el diagnóstico de cisticercosis humana^ies / Evaluation of enzyme-linked immunoelectrotransfer blot test using purified native antigen mix from cisticercus fluid of Taenia solium for diagnosis of human cysticercosis
Fuente:Rev. peru. med. exp. salud publica;32(3):485-491, jul.-sept. 2015. ^bilus, ^btab, ^bgraf.
Resumen:Objetivos. Evaluar la eficacia de la prueba electroinmunotransferencia (EITB) para la detección de cisticercosis humana utilizando antígeno mix nativo purificado de líquido de cisticerco de Taenia solium. Material y métodos. Estudio observacional de evaluación de prueba diagnóstica. El antígeno mix nativo purificado se extrajo del líquido de cisticerco de cerdos naturalmente parasitados de áreas consideradas endémicas, se evaluó y seleccionó uno de los cuatro métodos de purificación: sulfato de amonio, lecitina de lentejas-sefarosa, Sephadex G-75 y electro-elución. La sensibilidad del antígeno purificado se determinó con EITB y fue evaluada con 50 sueros positivos a cisticercosis y la especificidad con 50 sueros negativos a cisticercosis (20 libres de infección parasitaria y 30 positivos a diferentes parasitosis). Resultados. La concentración óptima del antígeno mix nativo purificado para preparar las tiras EITB fue de 0,82 ug/mm. Por cromatografía de afinidad con lectina de lentejas-sefarosa se visualizaron y purificaron ocho glicoproteínas antigénicas específicas, siendo sus masas relativas de: 13, 14, 17, 18, 23, 24, 31 y 35 kDa; los antígenos purificados obtenidos por los otros métodos no fueron evaluados por EITB, porque no correspondieron a las proteínas antigénicas específicas consideradas entre 13 y 35 KDa. La prueba de EITB utilizando antígeno mix nativo purificado presentó 100% de sensibilidad y 100% de especificidad. Conclusiones. El antígeno mix nativo purificado mejora la eficiencia diagnóstica de la prueba de EITB. Recomendamos la preparación de un kit in house y su validación en campo para que pueda transferirse e implementarse en laboratorios de zonas endémicas del Perú. (AU)^iesEvaluate the efficiency of the enzyme-linked immunoelectrotransfer blot test (EITB) for the detection of human cysticercosis using purified native antigen mix from cysticercus fluid of Taenia solium. Material and methods. Observational study of the evaluation of the diagnostic test. The purified native antigen mix was extracted from the fluid of cysticercus from naturally parasitized pigs from areas considered endemic. Four purification methods were evaluated and one was selected: ammonium sulfate, lentil lectin-Sepharose, Sephadex G-75 and Electro-elution. The sensitivity of the purified antigen was determined with EITB and was evaluated with 50 sera positive for cysticercosis and the specificity with 50 sera negative for cysticercosis (20 free of parasitic infection and 30 positive for different parasites). Results. The optimal concentration of the purified native antigen mix to prepare the EITB strips was 0.82 ug/mm. By affinity chromatography with Lentil Lectin-Sepharose we visualized and purified 8 specific antigenic glycoproteins, their relative masses being: 13, 14, 17, 18, 23, 24, 31 and 35 kDa. The purified antigens obtained by the other methods were not evaluated by EITB because they did not correspond to the specific antigenic proteins considered between 13 and 35 kDa. The EITB test using purified native antigen mix showed 100% sensitivity and 100% specificity. Conclusions. The purified antigen native mix improved the diagnostic efficiency of the EITB test. We recommend the preparation of an in-house kit and field validation so that it can be transferred and implemented in laboratories in endemic areas of Peru. (AU)^ien.
Descriptores:Cisticercosis/diagnóstico
Taenia solium
Antígenos
Estudios Observacionales como Asunto
Medio Electrónico:http://www.rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/1678/1640 / es
Localización:PE14.1; PE1.1



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