| Id: | PE1.1
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| Autor: | Tirado, Carlos Alberto; Stone, John F. |
| Título: | Uso de la técnica: pintado de todo el cromosoma (Whole chromosome painting), para identificar cromosomas marcadores en líneas celulares pancreáticas^ies / I use of the technique: colored of the whole chromosome (Whole chromosome paintin), to identify chromosomes markers in pancreatic cellular lines
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| Fuente: | Acta cancerol;26(2):10-13, oct. 1996. ^bilus.
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| Resumen: | La hibridación in situ con fluorescencia, es un método altamente sensible para la detección de secuencias de ADN específicas en metafases preparadas en una lámina portaobjetos. Las aplicaciones de esta técnica de Fish se ven especialmente en la identificación de cromosomas marcadores en metafases de tumores sólidos y malignidades hematológicas. Los cromosomas marcadores son generalmente de origen no conocido y por lo tanto de significado clínico desconocido. La técnica denominada "Whole chromosoma paintin" o pintado de todo el cromosoma es una variante de la técnica de Fish que permite la identificación de cromosomas humanas o fragmentos de estos cromosomas no identificados con bandeo convencional. Este nuevo sistema íncluye una sonda que contiene secuencia única homólogas al ADN del cromosoma que deseamos identificar. Dicha sonda es marcada directamente con espectro o fluorócromo naranja o verde. Esta técnica ha tenido un gran impacto y como otra de las múltiples técnicas de Fish se ha convertido en una herramienta importante, en citogenética de tumores sólidos, en donde el progreso siempre ha sido bloqueado por dificultades técnicas como el obtener metafases de muy buena calidad, por la falta de crecimiento de algunos tumores y la contaminación de células normales con el parénquina tumoral. Sin embargo, esta técnica "Whole chromosoma painting" requiere metafases de alta calidad. Usamos en el presente estudio, sondas ONCOR para identificar cromosomas completos. Las sondas son desnaturalizadas e híbridadas a una metafase del tumor que se encuentra en una lámina portaobjetos. Después que se completa la hibridación , el exceso de sonda es removido mediante lavados. La sonda WCP es detectada por visualización con filtros especiales para espectros verde o naranja en un microscopio de fluorescencia... (AU)^iesIn situ hybridization is a highly sensitive method ford detection of specific nucleic acid sequences in specimens fixed on a microscope slide. Applications of in situ hybridization for chromosome identification include the identification include the identification of marker chromosomes in metaphase spreads. Marker chromosomes are usually of unknown origin and therefore, unknown clinical signicance (1). The whole chromosome painting system is a variant of the FISH technique that enable us to identify human chromosomes or human chromosome fragments non identifiable with conventional banding. The system includes a whole chromo some painting probe that contains unique sequence homologous to the DNA sequences along the entire length of the target chromosome. The probe is directly labeled with spectrum orange or green fluorochrome.This technique has had a great impact and other FISH techniques have become important tools in Cytogenetics of solid tumors where the progress has been always blocked due to abtain good quality metaphases, lack of growth of some kinds of tissues and contamination of normal cells with the tumoral parenchyma. However, “whole chromosomes painting” requires high quality metaphases. We used whole chromosome painting (WCP) probes (ONCOR) that illuminate the whole chromosome. The WCP DNA probe mixture of unique and repeated DNA sequences is hybridized to the target DNA affixed to the microscope slide. After hybridization is completed, the unbound probe is removed with sequential with sequential washes. The hybridized WCP probe is localized by the visualization of range or green target-specific probes, and blue DAPI counterstained DNA using a fluorescence microscope. (AU)^ien.
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| Descriptores: | Cromosomas
Sondas de ADN
Hibridación de Ácido Nucleico
Citogenética
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| Límites: | Humanos
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| Medio Electrónico: | http://repebis.upch.edu.pe/articulos/acta.cancerol/v26n2/a4.pdf / es
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| Localización: | PE1.1 |
