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Autor:Sandoval Peña, Gustavo Adolfo; Lazo Manrique, Fanny Elizabeth; Rodriguez Quispe, Edith Fanincia; Yarlequé Chocas, Armando; Zingali, Russolina B.
Título:Identificación molecular y actividad sobre sustratos cromogénitos de la venombina A del veneno de la serpiente peruana bothrops atrox^ies / Molecular identification and activity on substrates of the Peruvian snake venom to venombina cromogenitos bothrops atrox
Fuente:Rev. peru. biol;17(3):365-370, dic. 2010. ^bilus, ^btab, ^bgraf.
Resumen:En el presente trabajo se ha realizado la identificación molecular de la enzima similar a trombina (EST) del veneno de Bothrops atrox y se ha evaluado su actividad enzimática sobre diversos sustratos sintéticos. La enzima fue purificada utilizando tres pasos cromatrográficos, sobre Sephadex G-75, CM-Sephadex C-50 y Agarosa-PAB, determinándose su peso molecular por PAGE-SDS. La identificación molecular de la enzima aislada se realizó por la técnica de peptide mass fingerprinting basada en espectrometría de masas MALDI-TOF y posterior análisis in silico. Las actividades fibrinocoagulante y amidolítica fueron ensayadas sobre fibrinógeno bovino y BApNA, respectivamente, así como la hidrólisis sobre los sustratos cromogénicos específicos S-2238, S-2251 y S-2266. Como resultado de los ensayos bioquímicos y estructurales, la EST del veneno de B. atrox, presentó un peso molecular de 29,6 kDa. El análisis mediante espectrometría de masas de los péptidos obtenidos, permitió identificar a esta enzima como una venombina A, presentando una identidad del 75%. Del análisis de actividad enzimática, se obtuvo que la EST de B. atrox produjo coagulación del fibrinógeno bovino y presentó actividad sobre BApNA, S-2238 y S-2266, siendo incapaz de hidrolizar el sustrato S-2251. El empleo de estas aproximaciones estructurales y funcionales ha permitido lograr la identificación molecular del principal componente del veneno de B. atrox relacionado con su acción coagulante, así como evaluar en detalle la naturaleza de su actividad enzimática sobre diversos sustratos. (AU)^ies.
Descriptores:Serpientes
Venenos de Serpiente
Venombina A
Trombina
Compuestos Cromogénicos
Perú
Límites:Animales
Medio Electrónico:http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/biologia/v17n3/pdf/a12v17n3.pdf / es
Localización:PE1.1



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